Vysokoúčinná kapalinová chromatografie

Sylabus

* vyžadováno absolvování přednášky C230P05N: Separační metody nebo C230P51: Separační metody (kata)

1. Úvod do HPLC, její význam a aplikace, srovnání s dalšími separačními technikami. Obecné schéma a součásti vysokoúčinného kapalinového chromatografu. Základní pojmy a definice. Typy interakcí analytů, separační systémy.

2. Kinetické a termodynamické aspekty separace v HPLC. Distribuční konstanta, retenční faktor, účinnost chromatografické kolony, rozšiřování zón, tvary píku, chromatografické rozlišení.

3. Separační systémy: Chromatografie s normálními a obrácenými fázemi.

4. Separační systémy: Iontově výměnná chromatografie. Afinitní chromatografie. Gelová chromatografie.

5. Instrumentace: Čerpadla, dávkovací systémy, kolony, děliče toku, sběrače frakcí. Preparativní HPLC systémy.

6. Detekce: Principy detekce v HPLC, detektory, jejich konstrukce a parametry.

7. Kvalitativní vs. kvantitativní analýza v HPLC.

8. Praxe HPLC: Příprava vzorků, mobilních fází, obsluha a údržba přístroje a řešení problémů. HPLC systémy na trhu.

9. Aplikace HPLC ve farmaceutické analýze, analýze potravin a životního prostředí.

10. Aplikace HPLC v analýze biomolekul a makromolekul.

11. Trendy v moderní HPLC, Vícedimenzionální separační systémy. Miniaturizace, mikrofluidní systémy. Nové typy stacionárních fází a jejich vlastnosti.

12. Exkurze na pracoviště rutinně používající HPLC - společnost Quinta Analytica.

Anotace

Přednáška se zabývá vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC), jednou z nejčastěji používaných separačních metod v současné analytické chemii. Posluchači získají vedle nezbytného teoretického základu i ucelenou představu o praktickém využití této metody. Cyklus je zahájen připomenutím základních pojmů, retenčních charakteristik a vztahů mezi nimi. Následuje přehled běžných separačních systémů a mechanismů retence, které se v nich uplatňují. Značná pozornost je věnována instrumentaci, zejména popisu a funkci jednotlivých komponent HPLC systému. Posluchači jsou seznámeni s vývojem HPLC v posledních letech a s nejnovějšími trendy. Dvě přednášky jsou věnovány využití HPLC v každodenní praxi, je podán přehled hlavních aplikačních oblastí této separační metody. Cyklus je uzavřen exkurzí na pracoviště s rutinním HPLC provozem.

Pro pochopení přednášené problematiky je vyžadováno absolvování přednášky MC230P05N Separační metody nebo

MC230P51 Separační metody KATA.