Abstrakt
Za účelem detekování strukturálních změn CK molekuly vyvolaných vazbou substrátů byly analyzovány její tři dynamické stavy - volná CK molekula, s vázaným ATP, a s vázaným komplexem ATP + kreatin, pomocí "steady-state" a časově rozlišené fluorescencenční spektroskopie. Fluorescence vnitřních tryptofanových zbytků neznačené CK-ATP vykázala nejkratší dobu života 2.38 ns a rotační korelační čas 27 ns (ve srovn ání s časy 2.72 ns and 35 ns pro volnou CK), a jejich moderovaný návrat k delším časům 2.42 ns a 29 ns pro CK-ATP + kreatin komplex.
Data byla potvrzena pomocí anizotropie s fluorescenčně značenou CK ( CK-FITC ), který potvrdil stejnou závislost na vazbě substrátů rotačními časy (34 ns, 27 ns a návrat 30 ns). Výsledek ukázal existenci tří konformačních stavů založených na " minimalizačním energetickém principu" indukovaných vazbou substrátů.