Abstrakt
Cílem bylo analyzovat složky extracelulární matrix zodpovědné za hojení, především stanovit koncentrace matrixových metaloproteináz (MMP-1, MMP-2 a MMP-3) v tkáni odstraněné při operaci. Porovnat hojení ran po operaci rozštěpu rtu do sedmi dnů po narození a hojení ran po operaci podle klasického protokolu ve třech měsících věku.
Materiál a metody: Vzorky tkáně byly odebrány od 30 dětí (16 chlapců a 14 dívek), 17 dětí bylo operováno během prvního týdne po narození a 13 dětí bylo operováno ve 2-4 měsících věku. Stanovení MMP bylo prováděno v tkáňových zbytcích získaných chirurgickou excizí okrajů rozštěpu rtu, které jsou při výkonu odstraňovány jako nadbytečné.
Po odběru byla tkáň skladována zamrazením na -70 oC. Extrakce proběhla v kakodylátovém pufru po dobu 24 hodin při teplotě 2-8 oC.
Ke stanovení koncentrace celkové bílkoviny v tkáni byla zvolena Lowryho metoda. Koncentrace MMP-1, MMP-2, MMP-3 byly stanovovány metodou ELISA, pomocí kitů Amersham Biotrak Activity Assay (GE Healthcare UK).
Výsledky: MMP-1: u dětí operovaných během prvního týdne po narození byly naměřeny koncentrace 0,017 +- 0,023 µg/g bílkoviny (průměr +- SD), u dětí operovaných ve 2-4 měsících věku 0,028 +- 0,026 µg/g bílkoviny. MMP-3: u dětí operovaných během prvního týdne po narození byly naměřeny koncentrace 0,200 +- 0,142 µg/g bílkoviny, u dětí operovaných ve 2-4 měsících věku 0,155 +- 0,093 µg/g bílkoviny.
Koncentrace MMP-2 byly ve všech měřených vzorcích I po zředění vyšší než horn í mez koncentračního rozmezí kitů 12 µg/l. Závěr: Nezjistili jsme statisticky významné rozdíly v koncentracích celkové bílkoviny, či koncentracích MMP-1, MMP-2 a MMP-3 mezi skupinou dětí operovaných během prvního týdne po narození a skupinou dětí operovaných ve 2-4 měsících věku.