Odstoupení od pracovní smlouvy je jednostranné právní jednání, které (je-li učiněno v souladu se zákonem) má za následek, že se sjednaná smlouva ruší od počátku (ex tunc), tedy zpětně. Odstoupení od smlouvy je jedním ze způsobů zániku závazku.
Lze přitom hovořit o tzv. odstoupení zákonném (odstoupení od smlouvy z důvodů, které stanoví zákon) a o odstoupení smluvním, které je možné (nad rámec zákona) mezi smluvními stranami sjednat. Odstoupení od pracovní smlouvy musí být písemné, jinak se k němu nepřihlíží.