Porovnání stromálních buněk kostní dřeně z různých anatomických lokací z hlediska jejich možného klinického využití
Abstrakt
ÚČEL STUDIE U pacientů starších 40 let neposkytuje léčba chondrálních lézí kolena pomocí mikrofraktur uspokojivé výsledky. Jedním z přispívajících faktorů může být věk související s nedostatkem dostatečných mezenchymálních stromálních buněk, které jsou schopné účinně migrovat do požadovaného místa léze.
Současná aplikace mononukleárních buněk (MNC) nebo kultivovaných mezenchymálních kmenových buněk (MSC) izolovaných z kostní dřeně a naočkovaných na 3D skafoldu by mohla poskytnout alternativní zvýšení terapeutické účinnosti u těchto pacientů. Cílem naší studie bylo vyhodnotit dva různé zdroje kostní dřeně na izolaci progenitorových buněk.
Konkrétně byl materiál získaný z proximální holenní kosti a lícního hřebenu (běžně používaný zdroj kostní dřeně) porovnán z hlediska kvantity a kvality buněk a jejich vhodnosti pro buněčné léčení chondrálních lézí. MATERIÁL A ZPŮSOBY Kostní dřeň byla odebrána během totální náhrady kolenního kloubu z iliakálního hřebenu a proximální metafýzy holeně od deseti dobrovolníků starších než 40 let pomocí jehel aspirační biopsie.
MNC ze získaného materiálu byly izolovány, kultivovány a analyzovány na jejich fenotypové rysy. Oba zdroje byly porovnány, pokud jde o výtěžek a životaschopnost MNC a MSC, jakož i schopnost MSC chondrogenní diferenciace.
VÝSLEDKY Koncentrace / výtěžek MNC byl ve vzorcích z iliakálních hřebenů výrazně vyšší. Podobné výsledky byly získány s kultivovanými MSC po prvním průchodu, když byl porovnán poměr MSC / MNCs.
Kvalitativní analýza, která zahrnovala imunofenotypizaci MSC, životaschopnost a dobu zdvojnásobení populace, však neprokázala žádný rozdíl mezi dvěma testovanými zdroji kostní dřeně. DISKUSE Zejména u starších pacientů vedou terapie chondrálních defektů technikami stimulujícími kostní dřeň k neuspokojivým výsledkům.
Proto ortopedičtí chirurgové obrátili svou pozornost k léčbě založené na buňkách. Kostní dřeň lokalizovaná v pánevní kosti a metafýza dlouhých kostí (distální femur, proximální tibie) obsahuje mononukleární buňky, které mají vlastnosti MSC.
V souladu s ostatními autory byly v naší kohortě pacientů nalezeny kvantitativní rozdíly mezi buňkami ze dvou anatomických míst. Kvalitativně však nebyla pozorována žádná významná variabilita.
Také jsme potvrdili, že metafýza proximální tibie je vhodným zdrojem pro kultivované MSC. Navíc, na rozdíl od několika zpráv, se zdá, že kvalita těchto buněk s věkem pacientů neklesá.
ZÁVĚRY Iliakální hřeben představuje lepší zdroj kostní dřeně pro výtěžek MNC a MSC ve srovnání s tibií. Mezi izolovanými a kultivovanými buňkami však nebyl žádný kvalitativní rozdíl.
Analýza doby zdvojnásobení populace ukázala, že holenní kost je dobrým alternativním zdrojem MSC, které lze získat v terapeuticky relevantních číslech, například pro léčbu chondrálních lézí kolene.